【48812】猪中性粒细胞弹性蛋白酶(NEELA2) ELISA 试剂盒

  捕获抗体的包被微孔中，顺次参加标本、规范品、HRP符号的检测抗体，通过温育并完全洗刷。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的效果下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），核算样品浓度。

  1.本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、安排匀浆及相关液体样本中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE/ELA2)的含量；

  操作过程试验开端前，请提早装备好一切试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽可能的防止起泡。每次检测都应该做规范曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品契合试剂盒的查验测验规模。1.加样：别离设空白孔、规范孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔别离加规范品或待测样品100μl，留意别有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，悄悄晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反响120分钟。为确保试验成果有效性，每次试验请运用新的规范品溶液。2.弃去液体，甩干，不必洗刷。每孔加生物素符号抗体工作液 100μl（取1μl生物素符号抗体加99μl生物素符号抗体稀释液的份额制造，悄悄混匀，在运用前一小时内制造），37℃,60分钟。3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶符号亲和素工作液（同生物素符号抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此刻肉眼可见规范品的前3-4孔有显着的梯度蓝色，后3-4孔梯度不显着，即可停止）。7.依序每孔加停止溶液50μl，停止反响（此刻蓝色立转黄色）。停止液的参加次序应尽量与底物液的参加次序相同。为了可以更好的确保试验成果的准确性，底物反响时间到后应赶快参加停止液。8.用酶联仪在450nm波长依序丈量各孔的光密度（OD值）。 在加停止液后15分钟以内进行细心的检测。